《卫生署:人类定期检查与执行实验第一版》纸片感叹:在室温下,一般而言在 15 分钟内,化石几乎氯化钙,常常最少 60 分钟或愈来愈长久。
《外科检查和基础》第五版:氯化钙较快,最少 1 时长或数时长不氯化钙称作提早氯化钙症候群。
看到这里你明白一时长未有氯化钙的化石该如何执行吗?大多数人显然都不明白,包括之前的我。我在丁香园论坛纸片看到过关于这个情况的讨论,大多数人都是感叹不曾氯化钙就那样看、那样报。也有人感叹只报 PH、量、氯化钙时间等。
这些都不对,但是也无疑,因为书本上未撰写,的教会师也是这样的教会的。
但是《卫生署:人类定期检查与执行实验第一版》这本书纸片就详述了关于氯化钙提早化石的执行,下面我们就全家人学习一下。
的氯化钙
仗到抽取器皿后慢慢地呈现的现代的半固体凝胶的团块,一般而言在室温下几分钟内,开始氯化钙(趋于微小),此时之中可见表征混合团块。随着继续氯化钙,趋于愈来愈加匀质和十分微小,在氯化钙最后阶段数尚存少量的小凝团。在室温下,一般而言 15 分钟内,化石几乎氯化钙,常常最少 60 分钟或愈来愈长久。如果 60 分钟仍未有几乎氯化钙,应做记录。在家之中或用于避抽取化石,当将化石带回研究团队时,一般从未氯化钙。
也就是感叹氯化钙的化石显然含有不氯化钙的胶冻形如颗粒(凝胶形如团块),这不感叹明任何外科意义。然而,病菌丝的长期存在显然干扰统计分析。
请注意 1:氯化钙可以通过如上描述的肉眼请注意到和光学仪器进行时定位。随着的氯化钙,不摇动的卵子获得活摇动的并能。如果在光学仪器下请注意到卵子不摇动,则需要愈来愈长久来完成氯化钙过程。
请注意 2:氯化钙后曾,置室温下或 37 摄氏度孵箱之中,在一个二维合上器上,慢慢地轻轻混匀或旋转样本器皿,有效地产生一个均质的化石。
请注意 3:如果在 30 分钟内不氯化钙,不要开始统计分析,而是再等待 30 分钟。如果 60 分钟后仍未有氯化钙,按表列操作执行。
氯化钙提早的执行
有时候显然不氯化钙,这使得检查和趋于困难。在这种情况下,需要另行执行,机械混匀或核糖体磨碎显然是必要的。
1. 一些化石通过转入等体积的荷尔蒙培养液(如 Dulbecco 甲基缓冲盐水),并且用加样器反复吹打,可使其氯化钙。
Dulbecco’s 甲基盐缓冲液:
(1)Dulbecco’s PBS:将 0.2 g (KCL),0.2 g 甲基二氢钾(KH2P04),0.1 g 氯化镁(MgCL2.6 H2O,8.0 g 氯化钠(NaCl),2.16 g 甲基氢二钠(NaHPO4.7 H2O)和 1.00 gD-转入到 750 ml 纯净水之中。
(2)将 0.132 g 氯化钙(CaCl2.2 H2O)水合 10 mL 纯净水之中,边面团边较快转入上述溶剂之中。
(3)用 1 mmol/lNAOH 调节 PH 至 7.4.
(4)用纯净水定容至 1000 mL。
释义: 为了防止出现沉淀,CaCl2 应单独转入,较快转入并慢慢面团。
2. 反复(6~10 次)较快地通过接邻在注仗器的 18 号钝性针头(内径 0.84 mm)或 19 号针头(内径 0.69 mm), 可下降的非均匀情况下。
3. 应用一种类似物蛋白水解核糖体(EC)椰子酵素磨碎,有效地促使氯化钙。
椰子酵素的准备好:
用 Dulbecco 甲基缓冲盐水合成 10IU/mL 的椰子核糖体酵素。波罗酵素没法沉淀,通过面团,大部分核糖体某种程度在 15~20 分钟内沉淀。用 10IU/mL 的椰子核糖体酵素液与等体积的(1:1)(原书为 1+1,某种程度是手误)进行时一定量(1:2),用移液管吸头的尖部面团,37 摄氏度孵育 10 分钟。在进一步统计分析之前充分混匀。
请注意:这些执行显然直接邻影响精浆的生化、卵子生机和卵子形态,用于它们不能作记录。当计算卵子酸度时,不能考虑到 1:1(原在线为 1+1,我考虑到某种程度是出错)转入椰子酵素液使按 1:2 一定量。
尽信书不如无书
一直以来我们都是对的教会师对前辈听之任之,对于书籍也有如神物一般的崇拜。眼见,我们的书籍太多欠缺甚至出错的地方。统计分析只是其之中小小的一部分,我期望大家都某种程度在虚心学习的同时,要有怀疑一切的态度。这样我们才时会慢慢的去探究发掘出,我们才能学习到愈来愈多,才能进步!
编者: 张开平- 2022-04-28妇产科旧版mojito,开口惊艳!
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